domingo, 18 de septiembre de 2011

METODO DE CONCENTRACION POR SEDIMENTACION RITCHIE


Método de concentración por sedimentación ritchie
Fundamento: Se basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.
Unas ventajas que tiene este método es concentrar y no deformar las formas parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser examinada, se usa cuando se necesita una técnica para evaluación de tratamiento y determinación de frecuencia.
Material y equipo
*Centrifuga                                            *tubos de ensaye cónicos de 15 ml
*Gasa cortada en cuadros                   *Embudos de polietileno
*Vasos de precipitado de 50 ml         *Aplicadores de madera
*Pipetas Pasteur con bulbo                 *Portaobjetos de 26 x 76mm
*Cubreobjetos de 22 x 22                    *Microscopio
*Solución salina isotónica
*Solución de formaldehido al 10% éter
Método
1° con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr de materia fecal en el vaso de precipitado, se añaden 10 ml de solución salina y se homogeniza.
2°se filtra la suspensión a través de la gasa colocada en el embudo recogiendo el en el tubo cónico.                                             
3°se decanta y sobrenadante y se resuspende el sedimentocon solucion salina, sentrifugando, decantando y resuspendiendo dos veces mas .
4° al ultimo sedimento se agregan 10 ml de solucion formaldehido al 10% se mezcla y se deja reposar durante 10 min.
5° se añade despues 5 ml de éter, se tapan los tubos con tapones de caucho y se agitan enérgicamente durante 30 segundos.
                                                            




6°se centrifuga durante 2 min a 2000 rpm.
7°despues de centrifugar se observan 4 capas
*éter en la superficial
*un tapon de restos fecales
*formaldehído
*sedimento en el fonde del tubo,conteniendo los elementos parasitarios.

8°se decanta el sobrenadante
9°se introduce la pipeta pasteur hasta el sedimento, se extrae con cuidado una gota del sedimento y se coloca en un portaobjetos.
10°se le añade una gota de lugoly con uno de los ángulos del cubreobjetos se homogeniza, cubriendolo con el mismo.
11° se obseva la preparacion al microscopio con objetivos 10X y 40X



Resultados

                                  


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