Coproparasitoscopico directo

Coproparasitoscopico directo

Fundamento: Este método sirve para evidenciar u observar la presencia de un determinado parasito, y se trata de un método cualitativo que no permite conocer el numero de formas larvarias que hay por cada gramo de heces y por lo tanto la carga parasitaria.

Frotis fresco: Este es un método rápido pero muy poco seguro .Tiene la probabilidad de falsos negativos, por lo que es necesario de nuevo el procedimiento. Permite observar la motilidad de los microorganismos: amibas como los flagelos. Detecta huevos de helmintos y quistes.

Muestra biológica: Heces fecales frescas

Material :                                      Sustancias:

*Cubreobjetos                                *  Sol. Fisiológica al o.9%

*Pipeta Pasteur                               *   Sol. De yodo

*Vaso de precipitado

* Microscopio

Procedimiento:

1° sobre un portaobjetos limpio se coloca una pequeña y fina porción de materia fecal.

2°A esto se le agrega una gota de solución fisiológica.

3°Se coloca el cubreobjetos

4°Se observa

5°En otro portaobjetos se repite el mismo procedimiento pero ahora se tiñe con tinción de yodo

Es importante que los frotis no sean densos, si no transparentes. y que se haga la observación con diferentes muestras.

Tras la observación de trofozoitos se utiliza la tinción de yodo que tiñe quistes y destaca sus detalles (los trofozoitos mueren y resultan inidentificables).

La observación se hace siempre con el objetivo seco débil(10x)y con poca luz, se observa con el objetivo seco débil(40x).

Método de concentración – Flotación de faust

Método de concentración – Flotación de faust

Fundamento:

Esta método se utiliza solución de Zn, cuya densidad específica es de 1.180 (33%), que conforma un medio de densidad más alta que la de los huevos: Necátor 1.055, tricocéfalo 1.150, Áscaris fértil 1.110 y facilita que los huevos livianos de estos helmintos, con menor peso específico que la solución, se concentren y floten.

La concentración adecuada aconsejada es la que se usa como reactivo una solución acuosa de sulfato Zn al 33% con una densidad al 1.180. El agua utilizada diluye y lava la materia fecal. El filtrado con gasa doblada y evita que los detritos gruesos traspasen las paredes, la centrifugación enriquece en delgada película la superficie del líquido centrifugado con los huevos livianos de algunos helmintos.

Material:

*portaobjetos                                 *solución acuosa de sulfato de Zn

*cubreobjetos

*gasas

 Técnica:

1)   Mezclar bien una porción de materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.

2)   Filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de centrífuga, ayudándose con un embudo pequeño.

                                              

3)   Centrífuga el filtrado a 2500 rpm por minuto.

                                          

4)   Decantar el líquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior centrifugar nuevamente. Resuspender el sedimento.  

                                            

5)   Repetir el procedimiento 2 veces hasta que el líquido sobrenadante este listo.

                             

6)   Decantar nuevamente el líquido sobrenadante reemplazándolo por igual cantidad de solución  de sulfato de Zn al 33% .Mezclar bien la solución con el sedimento. centrifugar por 1 minuto a 1500 rpm.

                                            

7)   Tomar 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del líquido. Colocarlos en un porta-objetos y mezclarla con 1-2 gotas de lugol, colocar cubre-objeto.

               

8)   Examinar al microscopio y reporte sus resultados.

                                     

Método indicado para el diagnóstico de huevos livianos de helmintos (Necátor, tricocéfalos, áscaris, H. nana).

Resultados:

METODO DE CONCENTRACION POR SEDIMENTACION RITCHIE

Método de concentración por sedimentación ritchie

Fundamento: Se basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.

Unas ventajas que tiene este método es concentrar y no deformar las formas parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser examinada, se usa cuando se necesita una técnica para evaluación de tratamiento y determinación de frecuencia.

Material y equipo

*Centrifuga                                            *tubos de ensaye cónicos de 15 ml

*Gasa cortada en cuadros                   *Embudos de polietileno

*Vasos de precipitado de 50 ml         *Aplicadores de madera

*Pipetas Pasteur con bulbo                 *Portaobjetos de 26 x 76mm

*Cubreobjetos de 22 x 22                    *Microscopio

*Solución salina isotónica

*Solución de formaldehido al 10% éter

Método

1° con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr de materia fecal en el vaso de precipitado, se añaden 10 ml de solución salina y se homogeniza.

2°se filtra la suspensión a través de la gasa colocada en el embudo recogiendo el en el tubo cónico.                                             

3°se decanta y sobrenadante y se resuspende el sedimentocon solucion salina, sentrifugando, decantando y resuspendiendo dos veces mas .

4° al ultimo sedimento se agregan 10 ml de solucion formaldehido al 10% se mezcla y se deja reposar durante 10 min.

5° se añade despues 5 ml de éter, se tapan los tubos con tapones de caucho y se agitan enérgicamente durante 30 segundos.

                                                            

6°se centrifuga durante 2 min a 2000 rpm.

7°despues de centrifugar se observan 4 capas

*éter en la superficial

*un tapon de restos fecales

*formaldehído

*sedimento en el fonde del tubo,conteniendo los elementos parasitarios.

8°se decanta el sobrenadante

9°se introduce la pipeta pasteur hasta el sedimento, se extrae con cuidado una gota del sedimento y se coloca en un portaobjetos.

10°se le añade una gota de lugoly con uno de los ángulos del cubreobjetos se homogeniza, cubriendolo con el mismo.

11° se obseva la preparacion al microscopio con objetivos 10X y 40X

Resultados